通用型反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得zui大的”補(bǔ)償”,而且您的色譜柱的壽命也會變得更長。
通用型反相色譜柱操作步驟:
a.平衡開始時將流速緩慢地提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時間來平衡)
b.如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水”過渡”即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡;分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。
2.通用型反相色譜柱的再生
長期使用的通用型反相色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)??梢詫ιV柱進(jìn)行再生,在有條件的實驗室應(yīng)使用一個廉價的泵進(jìn)行柱子的再生。
通用型反相色譜柱在使用過程中易出現(xiàn)的問題和解決辦法
通用型反相色譜柱在使用中zui常見的問題就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正常現(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高(系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外),通用型反相色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染,如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。